Mesni ekstrakt
Mesni ekstrakt dobiva se vodenom ekstrakcijom nemasna mesa (govedina, junetina, konjsko meso). Budući da danas bakteriolozi rabe tvornički mesni ekstrakt u dehidriranu stanju dodajući ga hranjivim podlogama, navodimo za usporedbu recept za njegov pripravak u medicinskoj bakteriologiji prije šezdesetak godina.
Spremanje bujona dvostruke jačine:
"Prvo se spremi vodeni ekstrakt mesa. Najčešće se upotrebljava mršavo meso (krtina). Pola kilograma krtine je dovoljno za 1L mesnog ekstrakta. Meso se očisti od masti i isjecka na što sitnije komadiće i na 0,5 kilograma doda se 1L vode. Ostaviti smjesu 24 h u ledenici. Poslije toga procijediti smjesu kroz gazu, nakon toga smjesa je bistra, svijetlo crvena i s tankim slojem masti na površini - što se uklanja filtriranjem kroz papirnati filter. Kuhati smjesu na laganoj vatri 15 minuta. Ona će se zamutiti i postati tamnosmeđe boje (zbog zgrušavanja bjelančevina i promjene hemoglobina). Radi razbistravanja filtrirati i dopuniti vodom do prvobitne količine. Krajnji produkt treba da je bistar i žućkaste boje".
Ekstrakt kvasca
Ekstrakt kvasca dobiva se dehidriranjem kulture pekarskog kvasca, a ekstrakt je izvor grupe vitamina B, te organskog ugljika i dušika. Spomenut ćemo da se ekstrakti mogu pripremati iz krumpira, riže, mrkve, tla, prema propisanim recepturama.
Peptoni
Peptoni su izvor organskog dušika, a dobivaju se hidrolizom s kiselinama ili proteolitičkim enzimima iz bjelančevina životinjskog ili biljnog porijekla (meso, kazein, soja). Sadrže aminokiseline, proteoze i oligopeptide.
Agar
Agar, sredstvo upotrijebljeno za skrućivanje hranjivih podloga, smjesa je polisaharida agaroze i agaropektina. Dobiva se iz tihooceanskih crvenih algi rodova Gelidium i Gracilaria. Zagrijavanjem otopine kojoj je dodan agar u prahu (najčešće 10-20 g/L) na 100°C agar se rastopi, a na temperaturi oko 42°C skrućuje se vežući vodu pa nastaje konzistentna želatinozna masa, na kojoj se izvrsno razvijaju bakterijske kolonije. Takve podloge nazivamo krutim podlogama. Danas se rabe dehidrirane podloge u prahu, a uz njihov naziv uvijek stoji nastavak: „agar" za krute te: "broth, bujon ili voda" za tekuće medije. Npr. agar Slanetz-Bartley, Streptococcus selektivni bujon, peptonska voda i dr.
Prema konzistenciji hranjivi mediji dijele se na:
Tekuće hranjive podloge upotrebljavaju se u Erlenmeyerovim tikvicama ili epruvetama, polukrute u obliku dubokog agara u epruveti, a krute u Petrijevim zdjelicama (pločama) ili epruvetama u obliku kosog, dubokog i dubokog kosog agara.
Prema složenosti hranjive podloge se dijele na:
sadrže jednu supstancu, npr. peptonska voda
sadrže dvije ili više supstanci, a mogu biti:
omogućuju diferencijaciju ili razlikovanje jedne vrste bakterija od drugih, npr. na EC X-GLUC agaru razlikuju se plave kolonije Escherichia coli od drugih koliformnih bakterija koje su žućkaste boje.
omogućuju porast samo određenih rodova bakterija, npr. na SS agaru rastu samo bakterije rodova Salmonella i Shigella, a porast je drugih vrsta bakterija inhibiran sastavom podloge
Sterilizacija i pH-vrijednost
Sve se hranjive bakteriološke podloge moraju sterilizirati, a način sterilizacije točno je opisan na tvorničkoj ambalaži u kojoj je podloga dostavljena.
pH-vrijednost dehidriranih podloga namještena je na optimalne vrijednosti za svaku vrstu ili skupinu bakterija.
U slučaju da sami prema postojećoj recepturi pripremamo hranjivu podlogu, pH-vrijednost postići ćemo dodatkom 1 M otopine NaOH ili HCl.