Definicija nitrifikacije
Nitrifikacija je aerobni bakterijski proces oksidacije amonijaka u prirodi do nitratnog iona, koji predstavlja izvor mineralnog dušika za biljke i bakterije.
Nitrat je akceptor elektrona u procesima nitratnog disanja anaerobnih i fakultativno anaerobnih bakterija, a njegovom redukcijom nastaju plinoviti oblici dušika (N₂O, N₂) ili ponovno amonijev ion (natražna amonifikacija).
🔬 NH₃ → NO₂⁻ → NO₃⁻ (dvokoračni proces nitrifikacije)
Nitrifikacija I. faze (nitritacija)
Nitrifikacija I. faze (nitritacija) obuhvaća bakterijsku oksidaciju amonijeva iona do nitrita.
Karakteristike nitrifikatora I. faze:
- Gram-negativne, aerobne bakterije
- Kemolitoautotrofne bakterije roda Nitrosomonas
- Koriste amonijak kao izvor energije
- Ugljikov dioksid (CO₂) kao izvor ugljika
- Široko rasprostranjena u zemlji, slatkim, slanim i otpadnim vodama
Fiziološka skupina nitrifikatora I. faze uzgaja se u Vinogradski I. bujonu.
Vinogradski I. bujon
🧪 Postupak:
- Pripremljeni medij po 200 mL rasporedi u Erlenmeyerove tikvice
- Sterilizira autoklaviranjem
- Nakon inokulacije medija s 20 mL uzorka vode ili suspenzije tla
- Provjerava se prisutnost amonijeva iona i nitrita u tikvici
- Na bijelu porculansku pločicu stave se dvije kapi reagensa i jedna kap inokuliranog bujona
✅ Pozitivna reakcija: iščezavanje amonijeva iona i pojava nitrita
Nitrifikacija II. faze (nitratacija)
Nitrifikacija II. faze (nitratacija) obuhvaća bakterijsku oksidaciju nitrita do nitrata.
Karakteristike nitrifikatora II. faze:
- Gram-negativne, aerobne bakterije
- Kemolitoautotrofne bakterije
- Energiju dobivaju iz oksidacije nitrita do nitrata
- Ugljikov dioksid kao izvor ugljika
- Široko rasprostranjena u zemlji, slatkim, slanim i otpadnim vodama
- U područjima gdje teče proces mineralizacije organske tvari
Fiziološka skupina nitrifikatora II. faze uzgaja se u Vinogradski II. bujonu.
Vinogradski II. bujon
🧪 Postupak:
- Po 200 mL pripremljenog medija ulije se u Erlenmeyerove tikvice
- Sterilizira autoklaviranjem
- Nakon inokulacije medija s 20 mL uzorka
- Počevši od četvrtog dana inokulacije
- Provjerava se prisutnost nitrata u tikvicama
✅ Pozitivna reakcija: iščezavanje nitrata i pojava nitrita