Frakciona sterilizacija (tindalizacija)

Metodu je uveo John Tyndall, irski fizičar oko 1850. Para koja struji iz uzavrele vode upotrebljava se za sterilizaciju hranjivih medija sa sastojcima koji ne podnose temperaturu iznad 100°C (termolabilne komponente). Aparat koji služi za sterilizaciju u pari naziva se Kochov lonac.

To je cilindrična metalna posuda s poklopcem, u kojoj se voda zagrijava električnim grijačima. Iznad vode koja vrije nalazi se rešetka, na koju se stavlja hranjivi medij u Erlenmayerovoj tikvici tako da para struji oko nje. Tikvica s medijem za frakcijsku sterilizaciju stavlja se u Kochov lonac (može se upotrijebiti i obični, veći kuhinjski lonac s poklopcem) i kad se pojavi para te počinje izlaziti, ispod poklopca ili kroz otvor na aparatu počinje se mjeriti vrijeme od 30 min. Nakon toga inkubira se tikvica s podlogom u termostatu na 35°C/24 h. Sljedeća dva dana isti se postupak ponavlja.

Cilj je metode da se zagrijavanjem na 100°C unište vegetativni oblici bakterija, a sveprisutni sporogeni oblici otporni na kuhanje preživljavaju. Inkubacijom u hranjivom mediju na povoljnoj temperaturi spore u roku od 24 h prokliju pa se onda vegetativni oblici nastali iz spora ubijaju ponovnim zagrijavanjem na 100°C idućeg dana. Za svaku sigurnost postupak se ponavlja i trećeg dana.