🔬
Uvod u metodu otiska
Metodu otiska (engl. "Replica Plate Method") uveli su 1952. Lederberg i Lederberg.
Glavni ciljevi metode:
Izolacija mutanti otpornih na antibiotike
Otpornost na mutagene i karcinogene
Optimum temperature uzgoja
Optimalna pH vrijednost
🧪
Postupak metode
Koraci postupka:
- Na površinu odgovarajuće podloge nacijepi se bakterijska kultura iz koje se žele izolirati mutanti.
- Kad na podlozi porastu kolonije, na porasle kolonije lagano se pritisne sterilni baršun razapet na Petrijevoj ploči nešto manjoj od ploče na kojoj su porasle kolonije.
- Zatim se baršun opet lagano pritisne na istu vrstu podloge i podloge s različitim modifikacijama (dodatkom antibiotika, mutagena, karcinogena, s različitim pH).
- Poslije inkubacije na podlozi istog sastava porast će sve kolonije kao i na matičnoj ploči, a na pločama kopijama s modifikacijama porast će samo otporne kolonije (mutanti).
🔬
Primjena metode
Metodu je razradio Stilinović (1979.) za dokazivanje prisutnosti fizioloških skupina bakterija u vodi, sedimentu i tlu te njihovog pH i temperaturne valencije (slika 87).
Područja primjene:
💧 Voda
🏔️ Sediment
🌱 Tlo
📊
Shematski prikaz metode
