Vježba 3.7 - Bojenje bakterijskih endospora

Prva boja malahitno zelenilo nanese se preko razmaza fiksirane bakterijske kulture. Pridržavajući predmetno stakalce pincetom, preparat se zagrijava s donje strane iznad plamena dok boja ne počne isparavati (oko 15 sek), a potom se odmakne u stranu da se ohladi. Nakon otprilike minutu zagrijavanje se ponavlja još dva puta (trokratno zagrijavanje). Zagrijano malahitno zelenilo prodire kroz debelu stijenku endospore. Nakon toga se preparat ispere pod mlazom vode približno 30 sek. da bi se boja odstranila sa stanica koje nisu spore i međustaničnih površina. Kao kontrastno bojilo upotrebljava se safranin koji će, nanesen preko razmaza, obojiti vegetativne, odnosno stanice koje nisu sporulirale. U preparatu vidjet će se zeleno obojene endospore između crvenih ili ružičastih vegetativnih stanica (slika 25).