Poglavlje 3

Vježba 3.8 - Negativno bojenje kapsula

Negativno bojenje za dokazivanje bakterijskih kapsula

🎯

Negativno bojenje kapsula

Na jedan kraj suhe, čiste predmetnice kapnuti kap 5%-tne otopine nigrozina (ili crnog tuša) i u njoj suspendirati bakteriološkom ušicom materijal čiste kulture bakterija. Drugom predmetnicom dotaknuti jednim krajem kapljicu nigrozina, čekati da se kapljica proširi uzduž svoga ruba te razvući bojilo s bakterijskom kulturom preko površine prve predmetnice u što tanjem razmazu. Osušiti na zraku, ne fiksirati plamenom. Kapsule su neionske (ne posjeduju naboj), pa se boja samo nataloži na njih bez povezivanja kemijskim vezama. Pripremljen preparat promatrati imerzijskim objektivom.

Da bi se kapsula razlikovala od bakterija, osušeni se preparat naknadno oboji jednom bojom (najčešće karbol fuksinom ili metilenskim modrilom). U naknadno obojenu tuš-preparatu vidjet će se kapsule kao bezbojni omot, a unutar njih protoplazma bakterija bit će obojena ovisno o boji koja je upotrijebljena (slika 26).

🧪 Metilensko modrilo
Sastojci:
  • Metilensko modrilo 0,3 g
  • Destilirana voda 100,0 mL
🧪 Karbol fuksin
Otopina A:
  • Bazični fuksin 0,3 g
  • Etanol (96%) 10,0 mL
Otopina B:
  • Fenol 5,0 g
  • Destilirana voda 95,0 mL
Postupak priprave:
Nakon priprave, pomiješati otopine A i B.
Slika 26 – Bezbojne kapsule
Slika 26 Bezbojne kapsule vidljive u tamnoj podlozi s nigrozinom

Započni učenje?

Započni svoj put u bakteriologiji danas. Svako poglavlje je samostalna cjelina s teorijom, praktičnim vježbama i provjerom znanja.