Poglavlje 5

Oksidaza test

Detalji o oksidaza testu

Princip rada

Test se upotrebljava kao kvalitativna metoda za dokazivanje enzima oksidaze. Enzim oksidaza katalizira reakciju u kojoj se elektroni koji su uklonjeni sa supstrata izravno premještaju preko lanca enzima na molekularni kisik. Ove enzime posjeduju striktno aerobne bakterije koje imaju respiratorni metabolizam, pa je pozitivan oksidaza test znak da je riječ o aerobnim bakterijama.

Oksidaza test temelji se na bakterijskoj produkciji enzima indofenol oksidaze. Taj enzim u prisutnosti atmosferskog kisika katalizira oksidaciju fenilendiamina prisutnog u oksidaza reagensu do tamnoljubičaste komponente indofenola.

🧪

Postupak

Za izvođenje testa najprije je potrebno slomiti ampulu oksidaza reagensa (parafenilendiamino klorid) i njime natopiti membranski filtar. Potom se puna platinska bakteriološka ušica čiste kulture bakterija razmaže po filtru.

U roku od 30 sek do 1 min pojava tamnoplave boje znak je pozitivne reakcije oksidaze (slika 39). Slabo izražene reakcije koje se pojavljuju nakon 2 min ne uzimaju se kao pozitivne.

Plavo obojenje kod pozitivnog oksidaza testa (u sredini je test negativan)
Slika 39 Plavo obojenje kod pozitivnog oksidaza testa (u sredini je test negativan)

Započni učenje?

Započni svoj put u bakteriologiji danas. Svako poglavlje je samostalna cjelina s teorijom, praktičnim vježbama i provjerom znanja.