Uvod u test
Sposobnost razgradnje ureje (CH₄N₂O) ispituje se u tekućoj podlozi sa Stuartovim ureja bujonom.
Sastav Stuartova ureja bujona
Priprema podloge
Podloga se sterilizira 15 min/120°C bez ureje. Ureju je potrebno sterilizirati filtracijom kroz sterilni membranski filtar promjera pora 0,2 μm i uliti u Erlenmeyerovu tikvicu s ohlađenom (45°C) podlogom bez ureje te uliti u epruvete (stupac dubok 5 cm).
Princip rada
Ako bakterija posjeduje enzim ureazu, razgrađivat će ureju do ugljikova dioksida, vode i amonijaka. Stvoreni amonijak tvorit će u vodenom mediju s ugljikovim dioksidom amonij-karbonat, koji povisuje pH-vrijednost podloge, zbog čega će podloga pocrveniti.
Ako je bakterija ureaza-negativna, podloga će nakon razdoblja inkubacije ostati nepromijenjene žute boje (slika 29).
