🧪
Uvod u test
Za dokazivanje stvaranja indola upotrebljava se tekuća podloga bogata aminokiselinom triptofanom (triptofan bujon).
🧪
Sastav triptofan bujona za dokazivanje indola
Pepton
10,0 g
NaCl
5,0 g
Destilirana voda
1000 mL
pH = 7,0 ± 0,1
⚙️
Mehanizam testa
Ako bakterija posjeduje enzim triptofanazu, može razgrađivati triptofan do indola.
🔬
Kovaczev reagens test
Ako je u epruveti stvoren indol, dokazuje se dodatkom Kovaczevog reagensa. Indol je topiv u organskim otapalima i butanol (amilni alkohol) sadržan u Kovaczevom reagensu može ekstrahirati indol iz vodenog medija, te će isplivati na površinu tekućeg medija u obliku prstena.
Koncentrirani ekstrahirani indol će u prstenu reagirati s reaktivnom komponentom p-dimetilaminobenzaldehidom, te će prsten biti obojen crveno.
📊
Interpretacija rezultata
- + Pozitivna reakcija: Prsten crvene boje - bakterija stvara indol
- - Negativna reakcija: Prsten žute boje - bakterija ne stvara indol
