Uvod u test
Ovaj test služi za ispitivanje mogućnosti pojedine bakterije da rabi Na-citrat kao jedini izvor ugljika. Na-citrat sol je limunske kiseline, jednostavan organski spoj koji je jedan od osnovnih metabolita u Krebsovu ciklusu (ciklusu trikarbonskih kiselina). Neke bakterije mogu dobivati energiju iskorištavanjem citrata kao jedinog izvora ugljika, za razliku od ostalih fermentacija organskih molekula. Određivanje iskorištavanja citrata važno je u identifikaciji mnogih predstavnika porodice Enterobacteriaceae.
Podloge koje se koriste za test ne smiju sadržavati proteine i ugljikohidrate kao izvore ugljika. Najčešće upotrebljavana podloga za ispitivanje korištenja citrata je Simmonsov citratni agar.
Sastav Simmonsova citratnog agara
Mehanizam testa
U podlozi se nalazi Na-citrat kao jedini izvor ugljika i amonij-fosfat kao jedini izvor dušika. Bakterije iskorištavanjem citrata stvaraju natrijevu lužinu, a paralelnim korištenjem dušika iz amonij-fosfata amonijevu lužinu. Stvorene lužine podižu pH vrijednost medija iznad 7,6 te bromtimol plavo prelazi iz zelene boje (pH 6,9) u modru.