1. Određivanje titra bakterija
Pripremiti decimalna razrjeđenja uzorka vode i nacijepiti po 1 mL u seriju epruveta s hranjivim bujonom. Inkubirati epruvete na 22°C / 72 h. Pozitivna reakcija prisutnosti bakterija vidi se kao zamućenje podloge. Kao titar uzeti epruvetu s pozitivnim rezultatom na najvećem razrjeđenju.
Sastav hranjivog bujona
2. Određivanje broja kolonija saprofitskih bakterija metodom širenja razmaza
Homogenizirati uzorak površinske vode u Winklerovoj boci energičnim mućkanjem. Pripremiti seriju decimalnih razrjeđenja uzorka u epruvetama s 9 mL sterilne destilirane vode s dodatkom 0,3% NaCl. Po 0,2 mL uzorka iz pojedinih razrjeđenja pipetirati na ploču s hranjivim agarom i razmazati jednolično flambiranim drygalskim štapićem po podlozi. Nakon razdoblja inkubacije izbrojiti porasle kolonije na svim pločama i izračunati broj kolonija u 1 mL uzorka.
3. Određivanje broja kolonija saprofitskih bakterija metodom izlijevanja podloge
Homogenizirati uzorak površinske vode u Winklerovoj boci energičnim mućkanjem. Pripremiti seriju decimalnih razrjeđenja uzorka u epruvetama s 9 mL sterilne destilirane vode s dodatkom 0,3% NaCl. Po 0,2 mL uzorka iz pojedinih razrjeđenja pipetirati u prazne, sterilne petrijevke, te pomiješati s rastopljenim i do 45°C ohlađenim hranjivim agarom te ostaviti u horizontalnom položaju da se podloga stvrdne. Nakon razdoblja inkubacije izbrojiti porasle kolonije na svim pločama i izračunati broj kolonija u 1 mL uzorka.
4. Određivanje broja kolonija saprofitskih bakterija metodom membranske filtracije
Profiltrirati 100 mL uzorka bunarske vode, ili decimalna razrjeđenja površinske vode kroz membranski filtar promjera pora 0,45 μm (npr. nitrocelulozni filtar) i filtar položiti na Petrijevu ploču s hranjivim agarom. Nakon razdoblja inkubacije izbrojiti porasle kolonije na svim pločama i izračunati broj kolonija u 1 mL uzorka.