Crijevni enterokoki
Crijevni enterokoki ili enterokoki skupina su crijevnih bakterija indikatora fekalnih zagađenja vode, tla i namirnica. To su Gram-pozitivni, jajoliko izduženi koki, raspoređeni u parove i kratke lance. Posjeduju grupno-specifični polisaharid i spadaju u Lancefieldovu skupinu D. Na krvnom agaru ne stvaraju zone hemolize te ih nazivamo i nehemolitički streptokoki ili γ-streptokoki.
Taksonomija i značaj
Ovu skupinu čine bakterije roda Enterococcus s ukupno 16 vrsta, među kojima je s higijenskog stajališta najvažnija E. faecalis. Široko su rasprostranjeni u okolišu, nalaze se u fekalijama čovjeka i drugih vertebrata. Katkad mogu uzrokovati piogene (gnojne) infekcije.
Broj crijevnih enterokoka u pravilu pozitivno kolerira s brojnošću fekalnih i ukupnih koliformnih bakterija, ali ako koliformne bakterije nisu dokazane u uzorku, i sam nalaz enterokoka pouzdan je znak fekalnih zagađenja sredine.
Slanetz-Bartleyev agar
Crijevni se enterokoki uzgajaju na visoko selektivnoj podlozi Slanetz-Bartley na 37°C/48 h.
Podloga se sterilizira kuhanjem u vodenoj kupelji 20 min. Rast drugih bakterija koje se nalaze u uzorku inhibiran je Na-azidom, a crijevni enterokoki nesmetano rastu u njegovoj prisutnosti. Crijevni enterokoki reduciraju 2,3,5-trifeniltetrazolium klorid (TTC) u podlozi do crvenog spoja formazana te su njihove kolonije (promjera 0,5-2 mm) crveno obojene (slika 50a).
Nakon što kolonije porastu na Slanetz-Bartleyevom agaru za potvrdu crijevnih enterokoka, kolonije je potrebno premjestiti na Bile aesculin azide agar.
Bile aesculin azide agar inkubira se pri 44°C/4h. Rast Gram-pozitivnih bakterija inhibiran je žučnim solima, a rast Gram-negativnih bakterija Na-azidom, dok crijevni enterokoki nesmetano rastu u njihovoj prisutnosti. Crijevni enterokoki imaju sposobnost hidrolize eskulina do glukoze i eskuletina koji reagira s feriamonijevim citratom u podlozi, dajući precipitat crno-smeđe boje. Stoga su, nakon perioda inkubacije kolonije crijevnih enterokoka okružene crno-smeđom zonom (slika 50b).
Bile aesculin azide agar
Potvrda crijevnih enterokoka na Bile aesculin azide agaru inkubacija: 44°C/4h.