Usporedba broja kolonija ukupnih i fekalnih koliformnih bakterija
Homogenizirati uzorak površinske ili otpadne vode u Winklerovoj boci energičnim mućkanjem. Napraviti seriju decimalnih razrjeđenja uzorka.
Po 0,1 mL uzorka iz odgovarajuće serije decimalnog razrjeđenja nacijepiti metodom širenja razmaza na Petrijeve zdjelice s Endo agarom i EC X-GLUC agarom u duplikatu. Jednu seriju nacjepljenih ploča inkubirati na 35°C/48 h (ukupni koliformi), a drugu seriju na 44,5°C/24 h (fekalni koliformi).
Nakon razdoblja inkubacije prebrojiti na svim pločama kolonije te izračunati broj kolonija koliformnih bakterija u uzorku. Na pločama s EC X-GLUC agarom ponovno prebrojiti plavo obojene kolonije te izračunati postotak Escherichia coli u populaciji ukupnih i fekalnih koliforma.
Potom nakapati na ploču s EC X-GLUC agarom Kovazcev reagens i nakon 30 sek prebrojiti kolonije okružene crvenim prstenima.
Usporedba titra ukupnih i fekalnih koliformnih bakterija
Nacijepiti po 1,0 mL uzorka iz odgovarajuće serije decimalnog razrjeđenja u epruvete s EC-bujonom u dvije serije te inkubirati jednu seriju na 35°C/48 h (ukupni koliformi), a drugu seriju na 44,5°C/24 h (fekalni koliformi).
Nakon razdoblja inkubacije očitati titar i usporediti broj ukupnih i fekalnih koliformnih bakterija u uzorku.
Određivanje broja kolonija crijevnih enterokoka
Profiltrirati 10 i 1 mL vode kroz membranski filtar promjera pora 0,45 μm i filtar položiti na Petrijevu ploču sa Slanetz-Bartleyevom podlogom.
Ploče inkubirati na 37°C/48 h te izračunati broj kolonija crijevnih enterokoka po 1 mL uzorka vode.
Filtre na kojima su porasle crvene kolonije premjestiti flambiranom pincetom na površinu Bile aesculin azide agara tako da kolonije budu na zraku. Inkubirati ploče na 44°C/4h. Točno nakon četiri sata inkubacije očitati rezultat potvrde crijevnih enterokoka.
Oko kolonija crijevnih enterokoka vidljiv je tamno smeđi precipitat. Ovaj precipitat nastaje radi hidrolize eskulina do glukoze i eskuletina koji reagira s feriamonijevim citratom u podlozi, dajući precipitat crno-smeđe boje.