Sadržaj vježbi
Ove vježbe obuhvaćaju praktične radove iz sanitarnog testiranja vode i detekcije koliformnih bakterija. Studenti će naučiti metode za određivanje ukupnih i fekalnih koliformnih bakterija kroz tri faze testiranja.
Prethodni test u sanitarnoj analizi vode
Homogenizirati uzorak otpadne vode u Winklerovoj boci energičnim mućkanjem. Pripremiti seriju decimalnih razrjeđenja uzorka. Potom odpipetirati po 1 mL uzorka iz odgovarajuće serije decimalnog razrjeđenja u epruvete s MacConkeyevim bujonom. Nacjepljivanje obaviti u triplikatu u dvije serije. Jednu seriju nacijepljenih epruveta inkubirati na 35,0°C/48 h (ukupni koliformi), a jednu seriju na 44,5°C/24 h (fekalni koliformi). Nakon razdoblja inkubacije očitati titar i izračunati najvjerojatniji broj ukupnih i fekalnih koliformnih bakterija prema tablicama po McCradyju i GOST-u.
Potvrdni test u sanitarnoj analizi vode
Promiješati sadržaj prve epruvete s MacConkeyevim bujonom, gdje je dobivena pozitivna reakcija na ukupne i fekalne koliformne bakterije. Umočiti bakteriološku ušicu u epruvetu i izolirati pojedinačne kolonije metodom iscrpljivanja materijala pomoću bakteriološke ušice na Petrijevoj zdjelici s Endo agarom. Ploče na kojima su nacijepljene ukupne koliformne bakterije inkubirati na 35,0°C/48 h. Nakon razdoblja inkubacije odrediti jesu li porasle tipične i atipične kolonije, te izolirati nekoliko morfološki različitih pojedinačnih kolonija na kosom hranjivom agaru.
Završni test u sanitarnoj analizi vode
Izolirane čiste kulture koliformnih bakterija iz potvrdnog testa inokulirati u MacConkeyev bujon i podloge za dokazivanje IMVC reakcija biokemijske serije. Nakon inkubacije na 35,0°C/48 h očitati rezultate. Napraviti oksidaza i katalaza test te bojenje po Gramu. Pomoću skupljenih rezultata determinirati vrste bakterija pomoću Bergeyeva priručnika.