1. Ispitivanje toksičnosti fenola
🧪 Priprema uzoraka:
Pripremiti seriju različitih koncentracija fenola: 25, 50, 100, 200, 400, 500, 600 i 1000 mg/L.
U bočicu s 4 mL podloge za izvedbu testa nacijepiti 0,5 mL suspenzije kvasca. Bočicu nadopuniti do vrha (uz zabodenu dodatnu iglu za izlaz zraka) određenom koncentracijom fenola.
🎯 Kontrola:
Jednu bočicu, koja će služiti kao kontrolna fermentacija, nadopuniti destiliranom vodom.
⚙️ Princip testa:
- Ako fenol ne ubija kvasac → saharoza se fermentira → stvara se CO₂
- Stvoreni plin potiskuje tekućinu u otvorenu špricu
- Količina istisnute tekućine proporcionalna je volumenu stvorenog plina
- Ako fenol ubija kvasac → manja količina plina ili se plin neće stvoriti
🌡️ Inkubacija i analiza:
Nacijepljene bočice inkubirati na 28°C/18 h.
Nakon inkubacije očitati volumen istisnute tekućine u špricama.
Izračunati efektivnu koncentraciju fenola koja inhibira fermentaciju za 50% u odnosu prema kontroli (EC₅₀).