Poglavlje 14

Vježbe 14: Test toksičnosti s kvascem

Vježbe za test toksičnosti s kvascem

🧪

1. Ispitivanje toksičnosti fenola

🧪 Priprema uzoraka:

Pripremiti seriju različitih koncentracija fenola: 25, 50, 100, 200, 400, 500, 600 i 1000 mg/L.

U bočicu s 4 mL podloge za izvedbu testa nacijepiti 0,5 mL suspenzije kvasca. Bočicu nadopuniti do vrha (uz zabodenu dodatnu iglu za izlaz zraka) određenom koncentracijom fenola.

🎯 Kontrola:

Jednu bočicu, koja će služiti kao kontrolna fermentacija, nadopuniti destiliranom vodom.

⚙️ Princip testa:

  • Ako fenol ne ubija kvasac → saharoza se fermentira → stvara se CO₂
  • Stvoreni plin potiskuje tekućinu u otvorenu špricu
  • Količina istisnute tekućine proporcionalna je volumenu stvorenog plina
  • Ako fenol ubija kvasac → manja količina plina ili se plin neće stvoriti
Nacjepljivanje bočica za test toksičnosti s kvascem
Slika 65 Nacjepljivanje bočica za test toksičnosti s kvascem

🌡️ Inkubacija i analiza:

Nacijepljene bočice inkubirati na 28°C/18 h.

Nakon inkubacije očitati volumen istisnute tekućine u špricama.

Izračunati efektivnu koncentraciju fenola koja inhibira fermentaciju za 50% u odnosu prema kontroli (EC₅₀).

Test toksičnosti s kvascem Saccharomyces cerevisiae za različite koncentracije fenola i kontrolna bočica
Slika 66 Test toksičnosti s kvascem Saccharomyces cerevisiae za različite koncentracije fenola i kontrolna bočica (prva slijeva)

Započni učenje?

Započni svoj put u bakteriologiji danas. Svako poglavlje je samostalna cjelina s teorijom, praktičnim vježbama i provjerom znanja.