Poglavlje 15

Vježbe 15: Bakteriološko ispitivanje kvalitete namirnica

Praktične vježbe za ispitivanje kvalitete namirnica pomoću brzih testova.

🔵

1. Izvedba testa s metilenskim modrilom

U šest sterilnih epruveta uliti po 10 mL svježeg pasteriziranog mlijeka. Mlijeko u tri epruvete kontaminirati čistom kulturom Escherichia coli i inkubirati na 37°C/24 h. Preostale tri epruvete čuvati u hladnjaku na 4°C. Epruvete začepiti sterilnim čepovima. Za izvođenje testa s metilenskim modrilom u uzorak visoko kontaminiranog mlijeka bakterijama (proba) i nekontaminiranog mlijeka (kontrola) dodati po 1 mL 1%-tne otopine metilenskog modrila. Epruvete se začepe sterilnim čepovima i protresu tako da se dobije ravnomjerno obojenje. Pripravljene epruvete stave se u inkubator na 37°C i prati se vrijeme obezbojenja svakih 30 min. Na osnovi vremena obezbojenja odrediti kvalitetu mlijeka.

🔴

2. Izvedba TTC-testa

U šest sterilnih epruveta uliti po 10 mL svježeg pasteriziranog mlijeka. Mlijeko u tri epruvete kontaminirati čistom kulturom Escherichia coli i inkubirati na 37°C/24 h. Preostale tri epruvete čuvati u hladnjaku na 4°C. Epruvete začepiti sterilnim čepovima. Za izvođenje TTC-testa u uzorak kontaminiranog i nekontaminiranog mlijeka dodati 1 mL 2-3%-tne otopine TTC-a u destiliranoj vodi. Otopinu TTC-a potrebno je sterilizirati filtracijom kroz membranski filtar promjera pora 0,2 μm. Epruvete se začepe sterilnim čepovima i protresu da se sadržaj homogenizira. Pripravljene epruvete stave se u inkubator na 37°C i očita se intenzitet crvene boje za 30 min na spektrofotometru u odnosu prema mlijeku bez dodatka TTC-a kao slijepe probe. Ako je kvaliteta mlijeka vrlo visoka, crvena se boja u epruveti neće razviti.

🧪

3. Izvedba HIL-testa

Za izvođenje HIL-testa pripremiti po izboru suspenzije jedne serije uzoraka tvornički pakirane jetrene paštete, majoneze, kobasice, voćnog soka te paralelno suspenzije druge serije istih vrsta uzoraka inokuliranih 2 dana prije pokusa bakterijama Escherichia coli, Citrobacter freundii i Bacillus sp. Nacijepiti na Petrijeve ploče s hranjivim agarom s dodatkom 15 g/L želatine po 0,1 mL uzorka metodom širenja razmaza. Ploče inkubirati na 35°C/24 h. Ako je kvaliteta namirnice dobra, neće se pojaviti okolne prozirne zone želatinolize oko poraslih kolonija. Po 1 mL uzorka nacijepiti u epruvete za ispitivanje reakcije na indol. Iznad bujona objesiti trakicu filter-papira natopljenu 5%-tnom otopinom olovnog acetata. Epruvete inkubirati na 35°C/24 h. Ako je kvaliteta mlijeka dobra, reakcija na indol i produkciju H₂S bit će negativna.

Započni učenje?

Započni svoj put u bakteriologiji danas. Svako poglavlje je samostalna cjelina s teorijom, praktičnim vježbama i provjerom znanja.