Poglavlje 5

Stvaranje sumporovodika

Detalji o stvaranju sumporovodika

📖

Uvod

U epruvete za dokazivanje produkcije indola može se objesiti iznad površine bujona traka filtar-papira natopljena 5%-tnom otopinom olovnog acetata, osušena u termostatu, radi ispitivanja produkcije sumporovodika (H2S) iz aminokiselina koje sadrže sumpor.

Ako bakterija razgrađuje aminokiseline sa sumporom uz produkciju H2S, H2S će izlaziti iz bujona i na filtar-papiru reagirati s olovnim acetatom uz tvorbu crnog precipitata olovnog sulfida (PbS). Filtar-papir će pri tome pocrniti u donjem dijelu.

Dokazivanje H₂S na filtar-papiru sa olovnim acetatom
Slika 32 Dokazivanje H₂S na filtar-papiru sa olovnim acetatom
🧪

SIM medij za preciznije dokazivanje H₂S

Preciznije dokazivanje stvaranja H2S obavlja se na SIM mediju.

Pepton iz kazeina 20,0 g
Pepton iz mesa 6,6 g
C6H11FeNO7 0,2 g
Na2S2O3 × 5H2O 0,2 g
Agar 3,0 g
Destilirana voda 1000 mL
pH = 7,3 ± 0,2

Podloga SIM služi za dokazivanje stvaranja H2S (S), produkcije indola (I) i dokazivanje pokretljivosti (M) u polukrutom mediju. Medij se inokulira čistom bakterijskom kulturom metodom uboda i inkubira na 35°C/24 h.

Nakon inkubacije produkcija H2S dokazuje se kao crno obojenje medija (slika 33). Nakon očitavanja produkcije H2S, na površinu medija može se dodati Kovacszev reagens te očitati reakcija produkcije indola (slika 33).

🧪 Kovaczev reagens
  • p-dimetilaminobenzaldehid: 10,0 g
  • Butanol: 150,0 mL
  • Koncentrirana HCl (36%): 50,0 mL
Pozitivna reakcija na proizvodnju sumporovodika i indola
Slika 33 Pozitivna reakcija na proizvodnju sumporovodika (desno) te negativna (lijevo) i pozitivna (u sredini) reakcija na produkciju indola.

Započni učenje?

Započni svoj put u bakteriologiji danas. Svako poglavlje je samostalna cjelina s teorijom, praktičnim vježbama i provjerom znanja.